Medsocium.com

Артикова  Н. С., Умарова  М. М., Сайиткулов  А. М. НИИ Вирусологии МЗ Рузб, Ташкент (Узбекистан)

В последние годы выявлен ряд природных соединений, обладающих способностью индуцировать интерферон [1,2]. Некоторые их этих препаратов практически не токсичны и активны при пероральном и ректальном использовании [3,4]. Последнее обстоятельство делает их перспективными при энтеровирусных инфекциях.
В настоящей работе исследовалась эффективность перорального применения двух препаратов, созданных на основе растительных веществ- Мегоферон и Глас. При экспериментальном гепатите мышей.
Материалы и методы. Исследования проводили на белых беспородных мышах массой 10-12гр. Индукторы вводили животным перорально в объёме 0,1 мл. Мегоферон и Глас хорошо растворимы в воде, поэтому их растворяли в физиологическом растворе. Препараты получены из Института биоорганической химии АН РУзб.[Ташкент].
Титрование интерферона проводили на культуре клеток L-929. В качестве тест вируса использовали вирус энцефаломиокардита мышей. Титрование осуществляли методом учёта цитопатического эффекта на пластиковых панелях.
Вирус гепатита мышей (штамм «Мищерина») вводили животным внутрибрюшинно в объёме 0,2 мл [6,0 ед ЛД50]] на мышь.
Для статистической обработке данных о выживаемости животных использовали критерий Стьюдента.
Результаты исследования. Изучали интерферониндуцирующую активность препарата СНМ-1 в организме эксперминтальных животных в зависимости от дозы и пути введения. Мышам вводили различные концетрации препарата от 2 до 100 мг/кг веса. Уровень синтеза интерферона определяли в сыворотке крови животных при разных путях введения через 24 часа после индукции.
Оптимальная доза при пероральном, интразанальном и ректальном способах введения препарата СНМ-1 составляла 10 мг/кг веса. Титры сывороточного интерферона при пероральном способе использования препарата достигали до 2048 МЕ/мл, при ректальном пути введения, уровень синтеза интерферона была несколько выше 4096-8192 МЕ/мл (табл.1).

Таблица 1
Интерферониндуцирующая активность нового индуктора Глас в крови животных при разных путях введения

№ п/п	Доза, мг/кг	Путь ведения и титры сывороточного интерферона, 6 МЕ/мл
		Пероральное введение	Ректальное введение	Интраназальное введение
1. 2. 3. 4. 5. 6.	2 5 10 25 50 100	16-32 128-256 2048 2048 1024-2048 256-512	128-256 2048 4096-8182 2048 2048 2048	<4 <4 1024-2048 512 256-512 256

В таблице 2 представлены динамики поколения эндогенного интерферона в сыворотке крови мышей в ответ на пероральное введение препарата Глас в ранее установленной эффективной дозе. Как видно из таблицы 2, интерфероновый ответ различается при введении одной и той же дозы индуктора пероральным, ректальным и интраназальными способами. Так, при пероральном пути введения для Глас отмечается позднее включение системы интерферона с пиком продукции через 24 часов после индукции. По-видимому, это связано с участием различных клеток в синтезе интерферона в ответ на введение препарата Глас. Таблица 2 Динамика накопления интерферона крови животных при введении препарата Глас

 

№ п/п	Путь введения	Титры интерферона, МЕХмл
		4	12	24	48	72	96	120	144
1. 2. 3.	Перорально Ректально Интраназально	64-128 4096 64-128	256-512 8192 512	2048 4096-8192 1024-2048	1024-2048 512- 1024 2048	1024 256 512	512 64-128 64-128	256-512 4-8 8-16	128 <4 <4

При ректальном пути введения препарата Глас формирование интерферона начинается раньше, чем при пероральном пути введения индуктора. Поэтому, титр интерферона, регистрируемые в крови животных достигают максимума к 12 часам после индукции. Кроме того, в табл. 2 представлены данные, характеризующие динамику накопления сывороточного интерферона при интраназальном введении данного индуктора. Анализ полученных нами данных показывает, что динамика образования интерферона при ректальном введении препарата не совпадает с динамикой накопления интерферона при пероральном способе введения. Максимальные титры интерферона регистрируемые при ректальном пути введения препарата достигает к 48 часам после индукции. Результаты экспериментов по проверке противовирусного эффекта препарата Глас на модели гепатита мышей представлены в таблице 3. препарат вводили животным перорально за 24 и 4 часа до заражения и через 4 и 24 часа после заражения. Как оказалось, препарат Глас введенный за 24 часа до заражения животных статистически достоверно [Р < 0.001] увеличивает выживаемость в опыте по сравнению с контролем, что коррелирует с увеличением средней продолжительности животных [СПЖ]. Наибольшая защита [55%] отмечалась при пероральном применении Глас. Необходимо отметить высокую степень защиты мышей при введении Глас [40%] за 4 часа до заражения вирусом. При более поздним относительно времени введения препарата Глас защитный эффект сохраняется на высоком уровне. Таблица 3 Противовирусная активность препарат Глас при экспериментальном гепатите мышей

 

Время введения препарата по отношению к инфекции, ч.	Процент выживаемости	%- защиты	СПЖ, дни	Р
-24 -4 +4 +24	70 55 55 60	55 40 40 40	7,3 7,3 7,5 7,1	<0,001 <0,01 <0,01 <0,01
Контроль вируса	15	0	2,2	-

Обсуждение результатов. Исследуемый препарат Глас является производным растительных веществ, выделенных из высших растений произрастающих на территории Республики Средней Азии и Казахстана. Он обладает способности, стимулировать активное образование эндогенного интерферона в организме экспериментальных животных при различных путях введения. Приведенные результаты свидетельствуют о выраженной способности Глас индуцировать выработку интерферонообразования в крови экспериментальных животных, и позволяет рассматривать этот препарат как клинически перспективный индуктор интерферона. Одним из существенных преимуществ Глас перед известными индукторами, является его способность продуцировать образование высоких титров интерферона в организме экспериментальных животных при пероральном, ректальном и интраназальном способах его введении. Однако пероральный путь введения препарата приобретает особое значение при энтеровирусных заболеваниях, когда воротами инфекции является желудочно-кишечный тракт. Надо отметить, что защитный эффект препарата Глас в условиях наших экспериментов был несколько более выраженным при его пероральном введении и указывают на корреляцию между уровнем синтеза интерферона в организме животных и степенью защиты животных, зараженных вирусом гепатита мышей. Обращает на себя внимание тот факт, что препарат способен защитить мышей, как по профилактическом, так и по лечебном способе его применении. Полученные данные определяют перспективу применения Глас для профилактики и лечении энтеровирусных инфекций. 1. Сарымсаков А.А., Сайиткулов А.М. – Интерферониндуцирующая активность производных хлопковой целлюлозы. // «Патология», 1999, №3, стр. 79-80. 2. Умарова М.М., Сайиткулов А.М. – Индукция интерферона сосудрасширяющими и спазмалитическими препаратами при разных схемах их применения – // «Теоритеческой и клинической медицины» 2000, № 5, стр. 49-52. 3. Ершов Ф.И., Ауелбеков С.А., Асланов Х.А. – Связь структуры и функции у низкомолекулярных индукторов интерферона- В сб: «Молекулярная биология вирусов» 1985, М., стр. 209-221. 4. Ершов Ф.И., Чижов Н.Н., Тазулахова Э.Б. – Противовирусные средства, Санкт-Петербург, 1993, стр. 60-83.