Medsocium.com

Мицура В.М., Мельнов С.Б., Жаворонок С.В. УО «Гомельский государственный медицинский университет», Международный государственный экологический университет им. А.Д. Сахарова, г.Минск Хронический вирусный гепатит С (ХГС) является наиболее частым исходом инфекции вирусом гепатита С (HCV). Была доказана возможность репликации HCV не только в гепатоцитах, но и в периферических мононуклеарных клетках крови, в нейтрофилах, эритроцитах, тромбоцитах, в клетках костного мозга, селезенки и лимфатических узлов. Повреждение генетического аппарата лимфоцитов периферической крови способствует длительной персистенции вируса и развитию иммунной недостаточности. Можно предположить, что вирус гепатита С обладает мутагенным действием в отношении лимфоцитов периферической крови, что способствует их апоптозу и уменьшению количества функционирующих клеток. Цель исследования: определить частоту хромосомных аберраций у больных хроническим гепатитом С. Материалы и методы. Нами обследован цитогенетический статус у 14 больных ХГС. Среди обследованных больных было 8 мужчин и 6 женщин, средний возраст 37,3±2,7 лет. Группой контроля служили 129 клинически здоровых лиц, не имеющих маркеров HCV-инфекции. Оценку состояния генома проводили с помощью классического цитогенетического анализа. Объектом изучения явились лимфоциты периферической крови. Собранную венепункцией кровь культивировали 48 часов в питательной среде (среда RPMI-1640 и 15% эмбриональной телячьей сыворотки) с добавлением ФГА «ПанЭко» (Россия), деление клеток останавливали на 45 часу на стадии метафазы с помощью колхицина. После трехкратной фиксации пробы раскапывали на предметные стекла и приготовленные препараты окрашивали красителем Романовского-Гимзы. Цитогенетический анализ проводился на микроскопе «Nikon» (Япония) при увеличении ×1000. Учитывались все типы аберраций хромосом, идентифицируемые без кариотипирования – одиночные и парные фрагменты, дицентрические и кольцевые хромосомы, полиплоидные клетки, а также общее число аберраций и аберрантных клеток. Общее количество проанализированных метафазных пластинок – 2708, в контроле – 27917. Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием программы MS Excel 2002 и STATISTICA v.6.0. Для оценки значимости различия относительных величин частоты в независимых группах был применен t-критерий Стьюдента. Результаты и обсуждение. Результаты цитогенетического анализа у больных ХГС и лиц контрольной группы представлены в таблице. Значения р<0,05 выделены полужирным шрифтом. Таблица Сравнительный анализ цитогенетического статуса больных ХГС и лиц контрольной группы

 

Параметры	Группы сравнения		р
	ХГС (n=14)	Контроль (n=129)
Метафаз в анализе	2708	27917	--
Одиночные фрагменты, %	2,64±0,42	1,59±0,15	0,086
Парные фрагменты, %	1,15±0,26	0,71±0,08	0,177
Дицентрики и кольца, %	0,97±0,28	0,06±0,01	<0,001
Полиплоидные клетки, %	0,41±0,22	0,02±0,01	<0,001
Всего аберраций, %	4,26±0,49	2,23±0,19	0,006
Аберрантные клетки, %	5,14±0,65	2,05±0,17	<0,001

У больных ХГС отмечается увеличение общей генетической нестабильности, что выражается в значительном росте аберраций и аберрантных клеток (4,26±0,49 и 5,14±0,65 соответственно) по сравнению с аналогичными показателями контрольной группы (2,23±0,19 и 2,05±0,17 соответственно). Высокая частота аберрантных клеток обусловлена, прежде всего, увеличением числа дицентрических и кольцевых хромосом, а также полиплоидных клеток (во всех случаях p<0,01). Имеется тенденция к более частому выявлению одиночных и парных фрагментов хромосом, но статистически значимых различий не выявлено, вероятно, в связи с небольшим объемом обследуемой группы. Таким образом, у больных ХГС выявлена дестабилизация генома, характеризующаяся большой частотой аберраций хромосом за счет увеличения числа дицентрических и кольцевых хромосом, а также полиплоидных клеток. Следует продолжить накопление фактического материала для оценки влияния дестабилизации генома лимфоцитов на развитие иммунодефицитного состояния и взаимосвязь цитогенетического статуса с вирусной нагрузкой.