Medsocium.com

Касьяненко Т.В.., Раевская Г.Е. АОЗТ НПК “Диапроф Мед”, НТЦ Иммунобиотехнологий НТК “Институт монокристаллов” НАН Украины На сегодняшний день иммуноферментный анализ (ИФА) является основным методом серодиагностики гепатита С (ГС). Высокая чувствительность и специфичность иммуноферментных диагностикумов не исключает получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов анализа. Количество ложноположительных результатов зависит от уровня распространения инфекции в исследуемой популяции. По данным ряда авторов в иммунокомпетентной популяции с уровнем распространения ГС менее 10% (доноры, дети, беременные) при тестировании на диагностикуме, имеющем специфичность 99%, часть ложноположительных результатов составляет в среднем 35% (диапазон от 15 до 60%). В связи с этим чрезвычайно важно проводить дополнительные подтверждающие исследования первично положительных результатов. В качестве таких исследований применяется выявление антител к отдельным антигенам вируса методом рекомбинантного иммуноблота (РИБА) или ИФА. При этом образец, содержащий антитела к двум и более антигенам вируса гепатита С (ВГС), считается положительным, а содержащий антитела лишь к одному антигену ВГС - неопределенным. При оценке результатов ИФА положительным считается исследуемый образец с индексом позитивности (отношение оптической плотности образца к граничному значению тест-системы) выше 1,0. Теоретически, чем выше индекс позитивности образца, тем больше в нем концентрация специфических антител и тем меньше вероятность того, что результат анализа окажется ложноположительным. Целью исследования было установление зависимости между индексом позитивности образца, исследуемого на наличие суммарных антител к ВГС с применением тест-системы «DIA-HCV» производства ДиапрофМед (Украина), и вероятностью того, что образец окажется ложноположительным. Нами было исследовано 303 образца сывороток крови доноров, положительных по результатам тестирования в тест-системе «DIA-HCV». Для каждого образца рассчитан индекс позитивности. Для определения истинного статуса образцов, проводили их исследование на наличие антител к отдельным белкам ВГС в диагностикуме «DIA-HCV-different» производства ДиапрофМед и в коммерческой иммуноферментной тест-системе “Monolisa – anti-HCV-Plus” производства BIO-RAD (Франция). Среди сывороток, имеющих индекс позитивности выше 12,0 (60% от общего количества исследованных образцов), по результатам тестирования в «DIA-HCV-different» 97% образцов были определены как позитивные (50% из них имели антитела ко всем антигенам ВГС). В остальных образцах выявлены антитела только к одному антигену ВГС. Все исследуемые образцы определены как позитивные в тест-системе “Monolisa – anti-HCV-Plus”. Следовательно, образцы, имеющие по результатам тестирования в диагностикуме «DIA-HCV», индекс позитивности выше 12,0 с высокой долей вероятности можно считать истинно положительными. С уменьшением индекса позитивности образца, уменьшалась вероятность того, что образец является истинно положительным. При индексе позитивности менее 3,0 (7% от общего количества исследуемых образцов) только в 20% выявлялись антитела к отдельным белкам ВГС и только 5% из них имели антитела более чем к одному антигену вируса. По результатам тестирования в диагностикуме “Monolisa –anti-HCV-Plus” положительными определены 15% образцов, имеющих индекс позитивности менее 3,0 в тест-системе «DIA-HCV». Рис.1 Частота обнаружения истинноположительных результатов в зависимости от величины индекса позитивности исследуемых сывороток. Итак, при тестировании образцов крови на наличие антител к ВГС на тест-системе «DIA-HCV» при отношении оптической плотности исследуемого образца к граничному значению выше 12,0 можно с большой долей вероятности (выше 97%) утверждать, что такой образец окажется истинно положительным. Для определения истинного статуса образцов с низким индексом позитивности необходимо выявлять антитела к отдельным антигенам вируса гепатита С методом ИФА или РИБА. В случае получения неопределенных результатов, следует определять наличие генетического материала вируса методом ПЦР или проводить повторное обследование пациента не менее чем через 2-3 недели.