Можливості полімеразної ланцюгової реакції для ранньої діагностики менінгококового менінгіту

Віннікова Н.В., Нартов П.В., Лавелін С.Б., Комлєва Л.П. Харківська медична академія післядипломної освіти1, Харківський національний університет ім. В.Н. Каразіна2, Обласна клінічна інфекційна лікарня, м. Харків Серед гнійних бактеріальних менінгітів менінгококовий менінгіт викликає найбільшу стурбованість у світі через глобальне поширення менінгококової інфекції, високу летальність, схильність до виникнення епідемій. Діагностика менінгококового менінгіту бактеріологічним методом має серйозні обмеження, пов’язані зі складністю культивування збудника і використанням антибіотиків на догоспітальному етапі. Найбільш перспективним методом діагностики є полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР), яка на відміну від бактеріологічного методу дозволяє отримати результат через декілька годин від початку дослідження, не потребує присутності живих мікроорганізмів у досліджуваному матеріалі, має чутливість і специфічність, що досягають 100%. Метою нашої роботи було удосконалення ранньої діагностики менінгококового менінгіту ПЛР-методом виявлення ДНК Neisseria meningitidis "родовими" та "серогруповими" праймерами. Для визначення родової ознаки Neisseria був використаний ген бактеріальної 16S рибосомальної РНК. Специфічні "серогрупові" праймери розпізнають гени, що беруть участь у синтезі капсульних полісахаридів менінгококів: для серогрупи А – унікальний ген, що кодує УДФ-N-ацетил-d-глюкозамін-2-епімеразу (mynA), для серогруп В і С – гени, що кодують полісіалілтрансферазу-D (siaD). ПЛР для виявлення ДНК N. meningitidis серогруп А, В і С була використана вперше на Україні. Досліджено 87 зразків спинномозкової рідини (СМР), яка була взята у хворих при госпіталізації в клініку кафедри інфекційних хвороб ХМАПО з січня 2004 р. до серпня 2005 р. з клінічним діагнозом гнійний менінгіт. Бактеріологічним методом менінгококи були виявлені у лікворі 23 хворих (26,4%). В 13 випадках визначена серогрупа в реакції аглютинації з культурою менінгококів: А – 10, В – 2, С – 1. Методом ПЛР ДНК N. meningitidis виявлена в 43 зразках (49,4%), тобто тільки ПЛР-методом діагноз менінгококового менінгіту був підтверджений в 20 випадках. ПЛР з "серогруповими" праймерами дозволила визначити серогрупу менінгококів в більшій кількості випадків, ніж в реакції аглютинації з культурою. З 23 зразків ліквору хворих з бактеріологічно підтвердженим менінгококовим менінгітом в 19 зразках визначена серогрупа N. meningitidis методом ПЛР: А – 13, В – 4, С – 2. При виявлені в лікворі ДНК менінгокока в 87,3% випадків (в 36 зразках) була визначена його належність до серогрупи А, В чи С: А – 21, В – 10, С – 6. Серед менінгококових менінгітів переважали менінгіти, спричинені епідеміологічно небезпечною серогрупою А (48,8% в структурі менінгококів). При проведенні ПЛР-дослідження 20 зразків СМР, яка була взята під час контрольної люмбальної пункції (9-10 день лікування) у хворих з позитивною ПЛР на ДНК N. meningitidis при госпіталізації, в 7 зразках виявлялася менінгококова ДНК. ПЛР дозволила в ряді випадків виявити збудника і в пізні строки захворювання на тлі антибактеріальної терапії. Таким чином, ПЛР дозволяє значно підвищити рівень діагностики менінгококового менінгіту, вона є істотним і необхідним доповненням бактеріологічного методу.

Последние комментарии