Medsocium.com

Диго Р.Н., Хорошевская А.А.

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Владивостокский государственный медицинский университет Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию»

Гепатит В - глобально распространенная вирусная инфекция. Ежегодно в мире регистрируется около 50 млн. больных только острой ВГВ инфекцией, из них до 600 тыс. умирает. Из числа последних около 100 тыс. человек погибает от редких, особо тяжёлых фульминантных форм инфекции.
Гепатит С регистрируется повсеместно. По оценкам различных авторов число инфицированных вирусом составляет 200 – 300 млн. человек, что составляет 3 – 4,5 % населения земного шара.
Внедрение в лабораторную практику метода ПЦР предоставило возможность непосредственного обнаружения генома возбудителей вирусных гепатитов. Изложенное выше подтверждает актуальность работы.
Цель исследования: определение взаимосвязи между серологическими маркёрами (а/т и а/г) и результатами ПЦР.
Задачи исследования: определение маркёров вирусных гепатитов, подтверждение диагнозов методом ПЦР, определение наиболее часто встречающихся генотипов ВГС у пациентов, находящихся на лечении в инфекционном отделении ККБ №2 и обратившихся в поликлинику больницы.
Материалы и методы:
Контингентом служили пациенты, находящиеся на лечении в инфекционном отделении ККБ №2 и обратившиеся в поликлинику больницы. Материалом исследования служила сыворотка больных (137 образцов) и плазма крови (137 образцов). Серологические маркеры выявляли путем проведения ИФА сывороток крови на тест-системах производства «Вектор-Бест». ПЦР – анализ на ВГВ и ВГС проводили на реагентах марки «ДНК-технология». Амплификацию проводили на термоциклере «iQ5» («Bio-Rad»США).
Результаты исследования:Результаты исследований представлены в таблице 1.
Таблица 1

ВГВ

ВГС

ИФА-маркёры

Кол-во обследо-ванных

ДНК HBV+

ДНК HBV-

ИФА-маркёры

Кол-во обследо-ванных

РНК HCV+

РНК
HCV+

HBsAg +
А/т -

30

30
(100%)

0

IgM +
IgG +

35

35
(100%)

0

HBsAg -
А/т +

13

0

13
(100%)

IgM -
IgG +

28

20
(71%)

8
(29%)

Отсутствие любых
ИФА-маркёров

4

0

4
(100%)

IgM -
IgG -

27

0

27
(100%)

ИТОГО

47

30
(64%)

17
(36%)

ИТОГО

90

55
(61%)

35
(39%)

У 47 пациентов осуществили параллельное выявление иммуноферментных маркеров ВГВ и ДНК-ВГВ. ( Таблица 1). У 30 обследованных (100%), положительных по HBsAg, обнаруживалась в крови ДНК HBV. При обследовании 13 пациентов, имеющих какие-либо антительные маркеры, но при этом не имевших антигенов ВГВ, ПЦР была отрицательной в 100%. Среди всех пациентов, обследованных на наличие ВГВ было выявлено 4 человека, предъявляющих гепатологические жалобы, но не имеющих никаких серологических маркеров ВГВ, ПЦР также дала отрицательный результат.
У 90 пациентов осуществляли параллельное выявление иммуноферментных маркеров ВГС (IgM HCV и IgG HCV ) и РНК-ВГС. У 35 обследованных, при одновременном наличии IgM HCV и IgG HCV, в 100% случаев ПЦР в плазме РНК HCV была положительной. Из 28 пациентов, положительных по IgG HCV (при отсутствии IgM HCV), у 20 человек (71%) - ПЦР на ВГС давала положительной результат, а у 8 человек (29%) – отрицательный. При этом, как в случае с ВГВ, 27 пациентов, предъявляющих гепатологические жалобы, без каких - либо серологических маркеров, при проведении ПЦР НСV был получен отрицательный результат.
У 13 человек было проведено генотипирование гепатита С. Оказалось, что у обследованных чаще всего встречался гепатит с генотипом 1в (у 4-х из 13 человек -31%) и 3 а\в (у 4-х из 13 человек -31%), реже встречался генотип 1а (у 2-х из 13 человек-16%).
Таким образом, обнаружение HBsAg в 100% случаев совпадало с выявлением ДНК HBV в плазме крови обследуемых, при этом наличие только антител не давало положительного результата в ПЦР. Присутствие в сыворотке пациентов IgM ВГС полностью совпадало с наличием вирусной РНК в плазме у этого же человека. При этом, если у пациента не определялись IgM ВГС, это ещё не являлось гарантией отсутствия РНК ВГС. На данном этапе работы судить о преобладании того или иного генотипа не представляется возможным, в связи с небольшим количеством обследованных пациентов. В ходе мониторинга за ВГВ и ВГС необходимо комплексное применение методов лабораторной диагностики – ПЦР и ИФА.